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Sysmex干扰物试剂盒您用过吗


近日,正在考虑干扰内容时,却被如何去准备进行黄疸、溶血和脂血的干扰实验苦恼。因为难以为这些干扰物的高浓度做好准备。恰好,遇到实验室老朋友介绍,说Sysmex有干扰试剂盒,非常方便。经过与Sysmex联系后,果然有干扰试剂盒。


这里,我将目前我收集到的信息汇集告诉大家。


近年来,由于实验室检测项目的日渐丰富、全自动仪器的大量导入运用,以及临床对于检测结果精度的重视,样品中共存干扰成分对结果的的影响越来越受到大家的关注。特别是实验室认证也增加了仪器和配套试剂的抗干扰能力的验证。


干扰对于总分析误差有时是一个主要因素,每个病人结果与真值间的偏离可能有三个原因:

-- 系统偏差

-- 不精密度

-- 干扰


干扰实验评估主要是估计偏移和不精密度的作用,实验室可以通过评估找到对干扰物敏感度不高和确定的检测方法及产品。

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一、干扰物质的来源

在临床化学检查中能影响结果的干扰物质可分为:

?(1)作为体内自身成分存在样本中的物质(内源性物质):可分为由于疾病因素造成样品中高浓度的胆红素、甘油三酯和在体外由于溶血血造成细胞成分游离到血清中的血红蛋白。

?(2)来源于外部物质和其代谢物质(外源性物质):

? 相当于药物的摄入产成的影响,如药物、非肠道维生素、血浆增溶剂、抗凝剂、营养补充、饥饿过度、酒精、药物中毒。

(3)样品采集到测定过程中混入的物质(样品污染物质)。

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相当于为了得到全血或血浆而添加的抗凝剂和稳定剂成分,如抗凝剂、防腐剂、血清分离器、收集容器、塞子。


干扰试验通常受标本条件所限制,对实验室而言通常是溶血、黄疸和脂血。


二、干扰物质的影响实验

干扰物质的体外影响试验方法可考虑的方法可分为

1、添加实验法: 可通过在样品中添加干扰物质和对照管同时测定评估的方法,并且可分为

1)一种浓度判断是否有影响;

2)系列浓度对影响程度的调查。


2、采用病人样品的实验法:

通过病人样品(参考方法)和(常规实验室方法)进行两种测定方法进行评估。该方法的局限性主要是对实验变异缺乏控制对照,同时在某些项目检测上一般实验室也无法实现。


目前SYSMEX提供了一套商品化干扰物试剂盒极大方便和满足实验室对干扰物实验实施的需求。本试剂盒为冻结干燥品,由Bil.F(游离型胆红素)/Bil.C(结合型胆红素)/溶血Hb/乳糜等四种主要的内源性干扰物质组成一套试剂盒,使用时每瓶干扰物中加蒸馏水溶解(2.0ml)后即可使用。

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三、添加实验的介绍



干扰物质配制法

首先要准备一份混合血清

干扰物质配置法1


干扰物质的配制2


干扰物质BIL-C的影响(示例)

????????BIL的影响

????????内源性物质

????????结合胆红素

????????调整浓度为200~400mg/dl


干扰物质BIL-F的影响(示例)

????????BIL的影响

????????内源性物质

????????游离胆红素

????????调整浓度为200~400mg/dl

干扰物质HEMO的影响(示例)

????????内源性物质

????????溶血

????????调整浓度 50g/L(5000mg/dl)


干扰物质乳糜的影响

????????内源性物质(乳糜微粒)

????????检测前的饮食(外源性乳糜微粒)

????????调整浓度20000~30000度

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标准操作步骤

· 用蒸馏水2mL溶解,当天使用。(根据所需添加浓度不同,蒸馏水量不同)

· 溶解后的样品(干扰物质)0.3ml和事先准备好的混合血清2.7ml混合制成样品A。

· 溶解后的样品(空白)0.3ml和事先准备好的混合血清2.7ml混合制成样品B。

· 样品A和样品B按表2制成稀释系列。

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表? 系列干扰样品配制

稀释度

对照

1/10

2/10

3/10

4/10

5/10

样品A(ml)


0.1

0.2

0.3

0.4

0.5

样品B(ml)


0.9

0.8

0.7

0.6

0.5

稀释度

6/10

7/10

8/10

9/10

10/10


样品A(ml)

0.6

0.7

0.8

0.9

1.0


样品B(ml)

0.4

0.3

0.2

0.1

?0


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对上述稀释系列进行检测。实验标本和对照标本同时进行重复测定。求出测定值的平均值和精密度。

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实验结果评价

实验标本和对照标本的检测值间出现差值时,评估差值是否超过误差容许范围。


(1)单一浓度的影响判断:该方法采用最高可能性浓度进行实验检测。按理,该最高浓度无干扰影响时,一般可推定该浓度以下也无影响。然而胆红素的重氮法测定时,血红蛋白的红色对化学反应的负影响而相互减弱。这点也是必须考虑。


(2)系列浓度的影响判断:制作各浓度系列的干扰物质的标本,适用于对干扰程度的定量测定。干扰物质的影响实验通常采用该方法。CLSI提案制作包含0浓度的5个系列浓度标本,进行回归分析。IFCC提案2~5个浓度系列,同样进行回归分析。

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干扰实验用于检测某物质加到样品中所产生的系统误差(干扰物产生的是恒定系统误差),以评价分析方法的准确度。干扰实验既用于检测某方法的特异性,也用于检测干扰物质对方法的干扰作用。在具体的方法学评价实验中,首先要确定被试的可疑物质是否会引起误差。若引起误差,再进一步探讨引起误差的原因是方法特异性差,还是由于干扰。

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干扰实验的应用

如果加入物和样品中的分析物类似,与分析试剂发生交叉反应产生读数,影响了分析物测定的准确性,这种情况称为特异性差。例如,采用邻甲苯胺法测定葡萄糖时,甘露糖和半乳糖与试剂发生的显色反应。

如加入物不与分析试剂发生反应,但它改变了分析物与分析试剂间的反应,就是干扰。例如葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖,尿酸可以和葡萄糖氧化酶反应生成的过氧化氢发生反应,使部分过氧化氢不能参与第二步过氧化物酶的偶联反应,从而降低显色强度,产生负的测定误差,因此尿酸对该反应有干扰。

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本干扰物试剂盒特点:

· 物质浓度确定,不同批号的干扰物试剂盒有不同成分(干扰物)的浓度表。

· 稳定性好,本品是冻结干燥品,因此可在较长时间内供应同一批号的试剂盒。

· 乳糜浓度的高低采用浊度数(JIS工业用水试验基准)来表现,更科学、更客观。

· 各医院或实验组之间的抗干扰试验结果具有可比性。

· 在干扰检测用干扰物?A PLUS试剂盒内附有相应的空白对照物,因此可被用于检测的项? 目数也增加。


来自: 冯仁丰
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